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完结
【年龄差+强占有欲+极限拉扯+强取豪夺+强制爱】 位居高位疯批霸主×外表柔弱乖戾少女 那年，叶柠为了生计，扮猪吃老虎混进了北城豪门谢家。 谁能想到，华丽的府邸就此成为困住她的樊笼，而她是笼中雀，只由得一人把玩。 —— 某夜，浑身酒气的男人将她搂进怀里，她浅浅啜泣，求他，“放过我......” 男人清淡眉眼浮上几分兴致盎然，恶劣如他，没有心生怜悯，更没打算放过她，嶙峋细白的指尖划过她柔弱娇美的脸...他的嗓音低沉懒散且带有某种恶趣味，“你觉得可能吗.......” 女孩示弱无果，望着他墨色逐深的欲眸，一双纯净如琥珀的漂亮眼睛恶狠狠地盯着他，咬唇低低骂了声，“禽兽......” —— 多年后，刚打赢一场国际官司的叶柠回到事务所 前台小姑娘满面娇羞说有人找她 叶柠推开办公室的门，一股熟悉的略带苦涩的凛冽薄荷香扑面而来，她浑身的血液在刹那间凝固。 男人背对着她，手背上的青筋在阳光下是漂亮的幽蓝，如此好看的一双手，抚过她的唇，掐过她的腰...谢聿礼闻到空气中多出来的甜丝丝的味道，缓慢转身，唇角笑容讽刺，“好久不见，柠柠。”
幻想纯爱
资源匮乏，妖邪遍地，陈林穿越到了一个诡异的世界之中。原本应该高高在上的修仙者，在这里却成了妖魔鬼怪的猎食对象，处境艰难。面对这种开局，陈林只有小心谨慎，发扬苟道精神，步步惊心的前行。直
群穿
近58 a我国西北地区干期与湿期变化特征 作者： 廉陆鹞 1 刘滨辉 1 作者单位： 1. 东北林业大学林学院，黑龙江哈尔滨150030 通讯作者： 刘滨辉 Email:lbinhui@yahoo.com 提交时间： 2019-11-15 摘要: 利用西北地区1960—2017年68个站点逐日降雨气象数据，分别将日降雨小于（大于等于）0.1 mm和1 mm定义为旱日（湿日），从干期和湿期变化特征的角度分析西北地区雨日年内分配变化。结果表明：西北地区东部年降雨量变化不明显，降雨频率下降，平均降雨强度增加；西北地区西部年降雨量、降雨频率和平均降雨强度均呈现增加趋势，平均降雨强度增加主要是由于降雨量增加速率快于降雨频率增加速率。结合干期和湿期变化特征，发现西北地区东部虽然干期旱日总数增加，但干期平均长度、干期次数和最长干期旱日数变化不明显，同时湿期湿日数和次数减少，说明西北地区东部在降雨量不变情况下，降雨更加集中。在西北地区西部，干期次数增加，但干期旱日总数、干期平均长度以及最长干期旱日数减少，湿期湿日数和湿期次数增加，湿期平均长度不变，西北地区西部在降雨量和降雨频率增加过程中，干期持续时间缩短，对该区域农业生产和生态环境有利。另外，使用不同阈值会影响特征值变化趋势大小及其显著性，甚至会得到相反的变化趋势，说明选择合理阈值对于研究降雨、干期以及湿期变化十分重要，需要结合区域气候特征进一步研究。 干期 湿期 雨日分配 阈值 分类： 地球科学 >> 地理学 引用： ChinaXiv:201911.00031 (或此版本 ChinaXiv:201911.00031V1 ) doi:10.12074/201911.00031 CSTR:32003.36.ChinaXiv.201911.00031.V1 推荐引用方式： 廉陆鹞,刘滨辉.(2019).近58 a我国西北地区干期与湿期变化特征.干旱区地理.[ChinaXiv:201911.00031] 版本历史 [V1] 2019-11-15 13:35:25 ChinaXiv:201911.00031V1 下载全文
时空穿梭
不同试剂转染RIP140-siRNA至库普弗细胞的效率及毒性比较 作者： 李吉 1 刘作金 2 作者单位： 1. （1）重庆医科大学第二临床学院，重庆 400016；（2）重庆医科大学附属第二医院肝胆外科，重庆 400010 提交时间： 2017-12-07 摘要: 目的 对比不同的转染试剂转染RIP140-siRNA至肝脏库普弗细胞的转染效率及它们对肝脏库普弗细胞的细胞毒性，从而寻找出最佳的肝脏库普弗细胞试剂转染方法和条件。 方法 以肝脏库普弗细胞为研究对象，以绿色荧光蛋白（GFP）标记的RIP140-siRNA为报告基因（reporter gene），采用lipofectamine 2000，罗氏试剂（X-treme GENE siRNA Transfection Reagent）及嘌呤霉素筛选的慢病毒（1.0×10 8 TU/mL）作为转染试剂，荧光倒置显微镜下观察细胞转染效果，激光扫描共聚焦显微镜分析不同试剂转染后细胞RIP140的表达，流式细胞术检测各组细胞凋亡，CCK-8检测各组细胞增殖抑制情况。收集细胞并进行裂解，提取细胞RNA与蛋白质，运用RT-RCR和Western blot实验法检测转染RIP140-siRNA后的基因及蛋白质表达情况。结果 对于肝脏库普弗细胞而言，在转染效率方面：嘌呤霉素筛选的慢病毒转染效率最高，可达90%以上；罗氏试剂其次；lipofectamine2000效果最差。在试剂的细胞毒性方面：流式细胞术及CCK-8检测结果显示罗氏试剂的细胞毒性最小，细胞可见其原有形态；慢病毒其次；lipofectamine 2000细胞毒性最大，可见多数细胞失去原有形态，并存在细胞裂解状态。RT-RCR和Western blot实验显示慢病毒转染RIP140-siRNA的肝脏库普氏细胞组无论在基因方面还是在蛋白质水平均明显低表达于lipofectamine 2000和罗氏试剂所转染的肝脏库普弗细胞组（P<0.05）。 结论 对于原代细胞肝脏库普弗细胞，在试剂转染方面，慢病毒转染方法可以达到理想的转染效率和较小的细胞毒性，且条件可控性与稳定性方面更加优越。 Abstract: Objective To compare the efficiency and cytotoxicity of different transfection reagents used in transfection of RIP140-siRNA into Kupffer cells to optimize the transfection conditions. Methods Kupffer cells were transfected with RIP140-siRNA labeled with GFP as the reporter gene using lipofectamine 2000, Roche reagent (X-treme GENE siRNA Transfection Reagent) and puro screening lentivirus (1.0�0 8 TU/mL) as the transfection reagents. The transfection effect was observed under a fluorescent inverted microscope, and laser scanning confocal microscopy was used to analyze RIP140 expression in trasnfected Kupffer cells. Flow cytometry was performed to detect cell apoptosis, and CCK-8 test was used to evaluate the cell proliferation inhibition. RT-RCR and Western blotting were performed to detect the expressions of RIP140 mRNA and protein in the trasnfected cells. Results Puro screening lentivirus yielded the highest cell transfection efficiency, which exceeded 90%, followed by Roche reagent and then by lipofectamine 2000. Flow cytometry and CCK-8 test showed that the cytotoxicity was the mildest with Roche reagent, moderate with lentivirus, and severe with lipofectamine 2000. The cells trasnfected with lentivirus showed a significantly lower RIP140 expression than cells trasnfected with lipofectamine 2000 and Roche reagent (P<0.05). Conclusion In Kupffer cells, lentivirus-mediated transfection, as compared with the other two trasnfection reagents, can achieve good transfection efficiency with a relativelty low cytotoxicity, and allows for better controllability and stability of the trasnfectiion conditions. 肝脏库普弗细胞 转染效率 细胞毒性 RIP140-siRNA 分类： 医学、药学 >> 基础医学 引用： ChinaXiv:201712.00709 (或此版本 ChinaXiv:201712.00709V1 ) doi:10.12074/201712.00709 CSTR:32003.36.ChinaXiv.201712.00709.V1 推荐引用方式： 李吉,刘作金.(2017).不同试剂转染RIP140-siRNA至库普弗细胞的效率及毒性比较.南方医科大学学报.[ChinaXiv:201712.00709] 版本历史 [V1] 2017-12-07 16:35:23 ChinaXiv:201712.00709V1 下载全文
丹修
等级这么一开口头提问，荣少亨的一颗心才总算是放下了，原来大多数记者所提到的问题竟然是有关《我们的法兰西岁月》今晚首映的事情，看起来自己的爆炒策略有效了，连这些娱记们都等不及了，更何况那些喜爱玄霆电影的老板姓们呢。
美强惨
评分刚出，还会涨 【娇软清醒钓系美人×病娇疯批偏执摄政王】 1v1双洁，HE，强取豪夺+救赎治愈 “我命都是你的，你确定要嫁与旁人？” 沈囡囡大婚当日，疯批摄政王将利剑抵在自己喉间，任凭血珠滚落， 笑着问她， “那不如拿我的命，给你的婚宴添道彩头。” 数月前，她重生了， 那少年浑身是血，还是个卑微如泥的马奴。 可她记得，两年后他将权倾朝野，沈家倾覆，他将她囚为禁鸾，夜夜承欢。 这一世，她学乖了，收起鞭子，换上媚骨，只想教他感恩，护住沈家。 她怕他，前世床笫之间他几近疯狂。 可她又不得不忍着颤抖，用前世从花魁处学来的手段， 对他笑， 对他好， 在他每一次怀疑审视的目光中，将自己伪装成最纯粹的救赎。 可她不知道—— 那看似虚弱的少年早已睁开狼一般的眼，将她的恐惧与讨好尽收眼底。 直到—— 所有人都咒这疯批早死，唯有她，一遍遍对他说： “阿朝，你要好好活。” 后来，他踏着尸山血海，却跪在她脚边，将锁链亲手递到她掌心。 “囡囡，” 他仰头，眼尾猩红， “锁住我，或者杀了我。” “别再逃。” 【阅读指南】 #他不懂爱，但嗜她如命# #女主又媚又清醒，男主又疯又能忍 #男主超爱，对外杀人如麻，唯对女主上瘾，从身体到心理的沦陷
后启示录
【年代】+【复仇】+【重生】+【空间】 苏婳三岁那年，在火车站跟家人走失，被老中医捡到收做徒弟。 十八岁被家人找回。 可在她被找回的第三天，家人却被举报调查了。 一向低调的苏家人很庆幸找到女儿的事情知道的人不多，为避免女儿跟着一起下乡吃苦，将她托付给了舅舅照顾。 但没想到舅母是个会算计的，为了苏家家产打晕苏婳，坏了她的名声，使她不得不嫁给陈川。 为了让爸妈放心，苏婳忍了。 可时间长了苏婳才发现，表面装的正经的丈夫，实际上是个渣男，不但囚禁家暴，还在外面朝三暮四。 实在恶心。 趁着陈川又一次跟寡妇约会的时候，苏婳在哥哥的帮助下举报了他，成功离了婚。 后来改革开放，她又觉醒了神秘空间，利用空间成了全国首富。 虽说后来的她什么都有了，却唯独少了家人的陪伴。 父母在乡下累垮了身子没能熬到回城那天。 大哥大嫂亏空太过久病缠身，三十多岁就失去了生命。 就连部队里的二哥，也因公殉职了。 带着浓浓的遗憾，苏婳不甘的闭上了眼睛。 再睁眼，她竟回到了命运转折的那一天。 震惊过后，苏婳握紧拳头。 这一次，她誓要好好保护家人，让他们长长久久的活着。 还有那些阴沟里的老鼠，她也不会放过！
权谋争霸
借精生子(借精生子)番外+大结局是作家wunny的最新作品,提供借精生子(借精生子)番外+大结局免费阅读,借精生子(借精生子)番外+大结局
国术
SF轻小说提供花影记：双影暗房小说在线阅读,花影记：双影暗房讨论服务
双强
【杀伐果断+暴力美学+食物链顶点+吞噬】 【有女主】【评分刚出，正在涨】 我叫叶璃诗，前世，以无敌之姿登临帝位，镇压一世。 陨落后，我重生回年少时，有了重来一次的机会。 我再次觉醒了无敌天赋，能将想象中的事物，具现到现实中来。 “这一次，我要具现出一个无敌的存在！” “它可以无限变强，永无上限！” “这黑红色史莱姆什么鬼！？” …… “穿越就算了，怎么连人形都没了？” 罗枉穿越，发现自己变成了一团不可名状之物。 好在，他拥有吞噬之力，能将吞噬的生命能量，转化为基因潜力。 “基因潜力？能进化出人类身体吗？” 【已开发超级人类身躯！】 “这么牛？要是有个数据面板就好了。” 【已开发基因面板！】 “吞噬效率有点低了。” 【已开发吞噬触须！】 “防御力不够！” 【已开发生物装甲！】 想啥来啥，要啥有啥！ “这哪里是基因潜力，这分明是俺寻思之力！” 于是，罗枉一路吞噬凶兽，无限进化自身，在为祸一方的道路上渐行渐远。 …… 多年后，叶璃诗重新证道。 面对那个凶气滔天，宛如魔神的存在。 她彻底懵了。 不是害怕，而是……这祸害怎么有点熟悉啊？
大男主
飞天缆车
当屁声此起彼伏之后，众人也就知晓这场聚会已经到了结束的时候
有没有可能也确实没钱
我觉得祁醉右手手腕出问题了，埋了快三次伏笔了吧
从千帐灯过来,一开篇有是这么凄凉无奈的文字,可以预见后文有多么悲剧!!!
这居然是个科幻文 =口= ！！！！！！！