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快速膜乳化技术制备均一小粒径、高浓度琼脂糖生化分离介质及用于抗生素高效分离纯化 作者： 朱凯 1 赵岚 1 黄永东 1 马光辉 1 作者单位： 1. 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室 提交时间： 2017-09-20 摘要: 琼脂糖微球是生化分离领域应用最广泛的分离介质基质，但尚存在微球粒径不均一、机械强度低以及原料的转化率低等问题，这导致生物大分子的分离纯化以及大规模层析生产效率低、工艺复杂化，成为了生化分离领域的发展瓶颈。常规搅拌等方法所制备的琼脂糖微球中琼脂糖含量大多小于6 wt%，当琼脂糖含量超过6 wt%时，水相粘度过大，传统的制备方法很难将高粘度的水相均匀地分散到油相中形成均一的乳液，导致生成的乳液粒径不均一。对于生化分离介质来说，小粒径介质能提供大比表面积，分辨率高；高琼脂糖含量不仅可以提高介质强度，还能丰富微球中的有效官能基团，为后续衍生应用提供基础。 本研究采用新型快速膜乳化技术，将琼脂糖加热溶解后，配制成所需浓度的琼脂糖溶液作为水相。将一定量的油溶性乳化剂溶于与水不相溶的有机相中并预热到一定温度下作油相。利用搅拌法将水相与油相混合制备得到W/O 型初乳液。利用快速膜乳化技术，通过调控压力，将初乳液迅速通过疏水修饰后SPG 膜得到粒径均一的W/O 型乳液，最后在缓慢搅拌的条件下冷却固化乳液胶凝，得到粒径均一的琼脂糖微球。 以6%琼脂糖浓度微球为例，在以石油醚及液体石蜡作为油相，与外水相体积比为1:6下，过膜压力0.3kgf/cm2的条件下，得到的微球平均粒径为30μm，Span值=0.62，CV 值=25%。对比市售Sepharose 6FF介质，粒径由90μm降到了30μm，而其CV 值提高了47%。而整个制球过程时间不超过10min，琼脂糖原料的成球转化率达到了100%。研究结果表明，当琼脂糖浓度分别达到8%、10%、12%、16%时，利用快速膜乳化法制备出的微球粒径可达28-32μm，Span值<0.9，CV 值<18%。 快速膜乳化制备的8%浓度琼脂糖微球经交联再通过烯丙基缩水甘油醚活化并偶联磺酸基制备成阳离子交换介质。上述介质用于纯化抗生素（万古霉素和螺旋霉素），粗品经柱上层析分离后，收集洗脱液，用HPLC分析纯品含量。研究结果表明，万古霉素纯度由88.7%提高至95.1%，螺旋霉素纯度提高至99.9%，纯度有了极大地提高。 快速膜乳化具有简单、高效等优点，在制备均一小粒径、高琼脂糖含量的分离介质方面具有突出优势。同时该方法也适用于其他载药纳微球的制备，有很好的应用前景。 分类： 生物学 >> 生物工程 引用： ChinaXiv:201709.00104 (或此版本 ChinaXiv:201709.00104V1 ) doi:10.12074/201709.00104 CSTR:32003.36.ChinaXiv.201709.00104.V1 推荐引用方式： 朱凯,赵岚,黄永东,马光辉.(2017).快速膜乳化技术制备均一小粒径、高浓度琼脂糖生化分离介质及用于抗生素高效分离纯化.中国生物工程学会.[ChinaXiv:201709.00104] 版本历史 [V1] 2017-09-20 14:38:07 ChinaXiv:201709.00104V1 下载全文

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(刚出评分)【七零+异能+缉毒+环环相扣+微悬疑+刺激爽燃】 五岁的糯糯天生“鬼耳”，隔着十里地能听见人心底的算盘声。 可她娘却记不住自己是谁，母女俩被扔在北大荒最穷的寡妇屯，雪夜住羊圈、馊水当顿、冻疮化脓。 全村把她们当成“疯寡妇和野种”。 直到那晚，她听见大队长偷偷说：“军区江阎王在找七年前失踪的未婚妻，画像跟姜知一个模子。” 糯糯把冻裂的小脚塞进草鞋，背着失忆的娘，揣着一把磨到飞快的镰刀，连夜穿过狼群出没的原始森林。 雪埋到大腿根，她就爬。 娘发烧说胡话，她割手腕喂血。 后来，母女俩摔在军区铁门前—— 小丫头把血抹在江阎王的军靴上，嗓子劈裂却字字清晰： “江际野！你媳妇我帮你养五年了，利息怎么算？” 全军震撼。 冷血著称的江阎王看着雪地那串小脚印，眼眶瞬间通红，单膝跪地，把母女俩一起裹进军大衣。 下一秒，他拔枪上膛，声音比数九寒风还狠： “传我命令，调侦察营，老子要血洗寡妇屯。” 糯糯窝在他颈窝，软软补刀：“爹，先留口气，他们欠我的粮票、冻疮膏、羊奶糖，得按十倍还。” 当天，军区最神秘的小公主诞生，全员宠上天。 而寡妇屯的恶人还不知道，他们欺负的不是孤儿寡母，而是江阎王失而复得的

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