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快速膜乳化技术制备均一小粒径、高浓度琼脂糖生化分离介质及用于抗生素高效分离纯化 作者： 朱凯 1 赵岚 1 黄永东 1 马光辉 1 作者单位： 1. 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室 提交时间： 2017-09-20 摘要: 琼脂糖微球是生化分离领域应用最广泛的分离介质基质，但尚存在微球粒径不均一、机械强度低以及原料的转化率低等问题，这导致生物大分子的分离纯化以及大规模层析生产效率低、工艺复杂化，成为了生化分离领域的发展瓶颈。常规搅拌等方法所制备的琼脂糖微球中琼脂糖含量大多小于6 wt%，当琼脂糖含量超过6 wt%时，水相粘度过大，传统的制备方法很难将高粘度的水相均匀地分散到油相中形成均一的乳液，导致生成的乳液粒径不均一。对于生化分离介质来说，小粒径介质能提供大比表面积，分辨率高；高琼脂糖含量不仅可以提高介质强度，还能丰富微球中的有效官能基团，为后续衍生应用提供基础。 本研究采用新型快速膜乳化技术，将琼脂糖加热溶解后，配制成所需浓度的琼脂糖溶液作为水相。将一定量的油溶性乳化剂溶于与水不相溶的有机相中并预热到一定温度下作油相。利用搅拌法将水相与油相混合制备得到W/O 型初乳液。利用快速膜乳化技术，通过调控压力，将初乳液迅速通过疏水修饰后SPG 膜得到粒径均一的W/O 型乳液，最后在缓慢搅拌的条件下冷却固化乳液胶凝，得到粒径均一的琼脂糖微球。 以6%琼脂糖浓度微球为例，在以石油醚及液体石蜡作为油相，与外水相体积比为1:6下，过膜压力0.3kgf/cm2的条件下，得到的微球平均粒径为30μm，Span值=0.62，CV 值=25%。对比市售Sepharose 6FF介质，粒径由90μm降到了30μm，而其CV 值提高了47%。而整个制球过程时间不超过10min，琼脂糖原料的成球转化率达到了100%。研究结果表明，当琼脂糖浓度分别达到8%、10%、12%、16%时，利用快速膜乳化法制备出的微球粒径可达28-32μm，Span值<0.9，CV 值<18%。 快速膜乳化制备的8%浓度琼脂糖微球经交联再通过烯丙基缩水甘油醚活化并偶联磺酸基制备成阳离子交换介质。上述介质用于纯化抗生素（万古霉素和螺旋霉素），粗品经柱上层析分离后，收集洗脱液，用HPLC分析纯品含量。研究结果表明，万古霉素纯度由88.7%提高至95.1%，螺旋霉素纯度提高至99.9%，纯度有了极大地提高。 快速膜乳化具有简单、高效等优点，在制备均一小粒径、高琼脂糖含量的分离介质方面具有突出优势。同时该方法也适用于其他载药纳微球的制备，有很好的应用前景。 分类： 生物学 >> 生物工程 引用： ChinaXiv:201709.00104 (或此版本 ChinaXiv:201709.00104V1 ) doi:10.12074/201709.00104 CSTR:32003.36.ChinaXiv.201709.00104.V1 推荐引用方式： 朱凯,赵岚,黄永东,马光辉.(2017).快速膜乳化技术制备均一小粒径、高浓度琼脂糖生化分离介质及用于抗生素高效分离纯化.中国生物工程学会.[ChinaXiv:201709.00104] 版本历史 [V1] 2017-09-20 14:38:07 ChinaXiv:201709.00104V1 下载全文

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不过，最麻烦的是，剑长老的法力却比起虎长老还要高上一截。 “你是赢不了我的，因为我是半步大道。” 半步大道！这是处在长生期与大道境之间的一个境界，这个境界，有些人要渡过，有些人不要渡过，而且进入的感觉也相当的模糊，有的人说不定便进入了，有些人死活进不去，这个半步大道的实力，要胜过长生期十重，又远不如大道境。 陆元现在的实力，最多越阶挑战长生十重，碰到了这种半步大道的人物，却又相当的无奈。 剑长老却是越打越狂，正好此时，鸣金收兵，这种鸣金收兵一旦开始鸣动，全部回来，没有什么人会留在战阵上面，你是长生十重了得又如何，如果战阵上面你孤身一人，对面全是对手，只怕也要死亡。 故而，一听这鸣金收兵，剑长老皱了皱眉：“也罢，下一回再来胜你，让你知道，妖魔当中的剑道天才，要远胜过你们仙侠中的正道天才。”他突的一声退了，陆元也无奈的皱了皱眉，退回了华山护山大阵当中。 …… 这一番鸣金收兵之后，陆元到是没有太不爽。 与剑长老的一战，自己确实是落在了下风。 不过，落在下风便落在下风吧。 人的一生，不可能永远的兰州资源环境职业技术大学不败。 只是，陆元也知道，现在的局势，未必有多妙，暗处的战局据说现在也拖在了僵处，而明处的战局，原来也处在实力相当的地步，但是现在剑长老居然是半步大道的实力，这就很麻烦了。 原来自己还可以天塌下来有高个子顶着，但是现在自己却绝不能这样说，因为自己现在已经成了高个子，成了长生期的剑仙，门派的中坚力量。一定要想办法到达长生九重，如此一来，才能战胜剑长老，以及蝠长老。 不是为了胜而去胜，是因为要守护华山。

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李无穿越修仙界，本是按着“炼气筑基、金丹元婴”的传统修炼境界修炼，却意外发现自己可以穿越到另外一方采气世界。于是，李无一边投机倒把，赚取两界灵物差价，一边修炼采气世界的“紫府金丹道”。

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